Hemostáza je komplikovaný, ale životně důležitý proces tvorby krevní sraženiny. Pro posouzení, jak tento proces probíhá, slouží široká škála laboratorních testů. Jedním z nich je trombin generační test založený na principu měření kinetiky tvorby trombinu po celou dobu srážení. Na rozdíl od klasických koagulačních laboratorních testů, jako je aktivovaný parciální tromboplastinový čas nebo protrombinový čas, poskytuje trombin generační test komplexnější informace o daném hemostatickém systému, a proto je zařazován mezi globální hemostatické testy. Nadměrně zvýšená nebo naopak snížená tvorba trombinu může být spojena s řadou patologických stavů. Nicméně výsledek trombin generačního testu může být ovlivněn reakčními podmínkami, například použitými aktivátory reakce nebo přítomností antikoagulačních léčiv (inhibitorů) ve vzorku. Tato léčiva mohou ovlivňovat jak celý proces tvorby trombinu, tak jednotlivé parametry trombin generačního testu. Takto nám tento test umožňuje blíže poznat princip účinku jednotlivých antikoagulačních léků na základě cílů, proti kterým jsou tato léčiva namířena.
Annotation in English
Haemostasis is a complicated but vital process of blood clot formation. A wide range of laboratory tests are used to assess this process. One of them is the thrombin generation assay based on the principle of measuring the kinetics of thrombin generation throughout the clotting time. Unlike classic coagulation laboratory tests, such as activated partial thromboplastin time or prothrombin time, the thrombin generation assay provides more comprehensive information about the haemostatic system in question and is therefore included among global haemostatic tests. Excessively increased or, conversely, decreased thrombin production can be associated with numerous pathological conditions. However, the result of the thrombin generation assay can be influenced by the reaction conditions, for example the reaction activators used or the presence of anticoagulant drugs (inhibitors) in the sample. These drugs can affect both the entire process of thrombin formation and the individual parameters of the thrombin generation assay. Thus, this assay allows us to get to know the principle of action of individual anticoagulant drugs based on the targets against which these drugs are directed.
Hemostáza je komplikovaný, ale životně důležitý proces tvorby krevní sraženiny. Pro posouzení, jak tento proces probíhá, slouží široká škála laboratorních testů. Jedním z nich je trombin generační test založený na principu měření kinetiky tvorby trombinu po celou dobu srážení. Na rozdíl od klasických koagulačních laboratorních testů, jako je aktivovaný parciální tromboplastinový čas nebo protrombinový čas, poskytuje trombin generační test komplexnější informace o daném hemostatickém systému, a proto je zařazován mezi globální hemostatické testy. Nadměrně zvýšená nebo naopak snížená tvorba trombinu může být spojena s řadou patologických stavů. Nicméně výsledek trombin generačního testu může být ovlivněn reakčními podmínkami, například použitými aktivátory reakce nebo přítomností antikoagulačních léčiv (inhibitorů) ve vzorku. Tato léčiva mohou ovlivňovat jak celý proces tvorby trombinu, tak jednotlivé parametry trombin generačního testu. Takto nám tento test umožňuje blíže poznat princip účinku jednotlivých antikoagulačních léků na základě cílů, proti kterým jsou tato léčiva namířena.
Annotation in English
Haemostasis is a complicated but vital process of blood clot formation. A wide range of laboratory tests are used to assess this process. One of them is the thrombin generation assay based on the principle of measuring the kinetics of thrombin generation throughout the clotting time. Unlike classic coagulation laboratory tests, such as activated partial thromboplastin time or prothrombin time, the thrombin generation assay provides more comprehensive information about the haemostatic system in question and is therefore included among global haemostatic tests. Excessively increased or, conversely, decreased thrombin production can be associated with numerous pathological conditions. However, the result of the thrombin generation assay can be influenced by the reaction conditions, for example the reaction activators used or the presence of anticoagulant drugs (inhibitors) in the sample. These drugs can affect both the entire process of thrombin formation and the individual parameters of the thrombin generation assay. Thus, this assay allows us to get to know the principle of action of individual anticoagulant drugs based on the targets against which these drugs are directed.
Provedení literární rešerše ke zvolené problematice
Zvládnutí základních laboratorních dovedností a zaškolení v obsluze automatického analyzátoru
Analýza vlivu různých koncentrací fosfolipidů a tkáňového faktoru na trombin generační test
Analýza vlivu přímých perorálních antikoagulancií a na trombin generační test
Zpracování dat a optimalizace metody
Závěrečná práce bude vypracována v souladu s doporučeným stylem pro závěrečné práce na oboru Biochemie PřF UP uvedeným na webové stránce Katedry biochemie https://www.prf.upol.cz/katedra-biochemie/studium/bakalarske-a-diplomove-prace/.
Student je povinen vložit ekvivalentní elektronickou podobu závěrečné práce do systému STAG a doplnit povinné údaje o své práci (viz Opatření děkana Přírodovědecké fakulty UP v Olomouci k provedení některých ustanovení Studijního a zkušebního řádu UP v Olomouci a Rigorózního řádu UP v Olomouci).
Research Plan
Provedení literární rešerše ke zvolené problematice
Zvládnutí základních laboratorních dovedností a zaškolení v obsluze automatického analyzátoru
Analýza vlivu různých koncentrací fosfolipidů a tkáňového faktoru na trombin generační test
Analýza vlivu přímých perorálních antikoagulancií a na trombin generační test
Zpracování dat a optimalizace metody
Závěrečná práce bude vypracována v souladu s doporučeným stylem pro závěrečné práce na oboru Biochemie PřF UP uvedeným na webové stránce Katedry biochemie https://www.prf.upol.cz/katedra-biochemie/studium/bakalarske-a-diplomove-prace/.
Student je povinen vložit ekvivalentní elektronickou podobu závěrečné práce do systému STAG a doplnit povinné údaje o své práci (viz Opatření děkana Přírodovědecké fakulty UP v Olomouci k provedení některých ustanovení Studijního a zkušebního řádu UP v Olomouci a Rigorózního řádu UP v Olomouci).
Recommended resources
Al Dieri R., de Laat B., Hemker, H. C. (2012) Thrombin generation: What have we learned? Blood Reviews, 26(5), 197-203.
Crawley J. T. B., Zanardelli S., Chion C., Lane D. A. (2007) The central role of thrombin in hemostasis. Journal of Thrombosis and Haemostasis, 5, 95-101.
Hemker H. C., Giesen P., Al Dieri R., Regnault V., de Smedt E., Wagenvoord R., Lecompte T., Beguin S. (2003) Calibrated automated thrombin generation measurement in clotting plasma. Pathophysiology of Haemostasis and Thrombosis, 33(1), 4-15.
Hluší A., Slavík L., Úlehlová J., Krčová V., Indrák, K. (2010a) Globální hodnocení funkce hemostázy - část I. Trombin generační test. Transfuze a hematologie dnes, 16, 65-70.
Hluší A., Slavík L., Úlehlová J., Krčová V., Zapletalová J., Indrák K. (2010b) Globální hodnocení funkce hemostázy - část II. Vlastní zkušenosti s použitím trombin generačního testu u pacientů s trombofilií. Transfuze a hematologie dnes, 16, 121-125.
Tripodi A. (2016) Thrombin Generation Assay and Its Application in the Clinical Laboratory. Clinical Chemistry, 62(5), 699-707.
Depasse F, Binder NB, Mueller J, Wissel T, Schwers S, Germer M, Hermes B, Turecek PL. Thrombin generation assays are versatile tools in blood coagulation analysis: A review of technical features, and applications from research to laboratory routine. J Thromb Haemost. 2021 Dec;19(12):2907-2917. doi: 10.1111/jth.15529. Epub 2021 Sep 26. PMID: 34525255; PMCID: PMC9291770.
Recommended resources
Al Dieri R., de Laat B., Hemker, H. C. (2012) Thrombin generation: What have we learned? Blood Reviews, 26(5), 197-203.
Crawley J. T. B., Zanardelli S., Chion C., Lane D. A. (2007) The central role of thrombin in hemostasis. Journal of Thrombosis and Haemostasis, 5, 95-101.
Hemker H. C., Giesen P., Al Dieri R., Regnault V., de Smedt E., Wagenvoord R., Lecompte T., Beguin S. (2003) Calibrated automated thrombin generation measurement in clotting plasma. Pathophysiology of Haemostasis and Thrombosis, 33(1), 4-15.
Hluší A., Slavík L., Úlehlová J., Krčová V., Indrák, K. (2010a) Globální hodnocení funkce hemostázy - část I. Trombin generační test. Transfuze a hematologie dnes, 16, 65-70.
Hluší A., Slavík L., Úlehlová J., Krčová V., Zapletalová J., Indrák K. (2010b) Globální hodnocení funkce hemostázy - část II. Vlastní zkušenosti s použitím trombin generačního testu u pacientů s trombofilií. Transfuze a hematologie dnes, 16, 121-125.
Tripodi A. (2016) Thrombin Generation Assay and Its Application in the Clinical Laboratory. Clinical Chemistry, 62(5), 699-707.
Depasse F, Binder NB, Mueller J, Wissel T, Schwers S, Germer M, Hermes B, Turecek PL. Thrombin generation assays are versatile tools in blood coagulation analysis: A review of technical features, and applications from research to laboratory routine. J Thromb Haemost. 2021 Dec;19(12):2907-2917. doi: 10.1111/jth.15529. Epub 2021 Sep 26. PMID: 34525255; PMCID: PMC9291770.
Enclosed appendices
-
Appendices bound in thesis
graphs, tables
Taken from the library
No
Full text of the thesis
Appendices
Reviewer's report
Supervisor's report
Defence procedure record
V úvodu obhajoby předsedkyně komise doc. RNDr. Lenka Luhová, Ph.D. představila studentku přítomným akademickým pracovníkům a hostům. V rámci prezentace své práce Stanovení vlivu přímých perorálních antikoagulancií na trombin generační test studentka seznámila všechny zúčastněné s cíli práce a hlavními metodami využitými při jejím zpracování, dále se získanými výsledky a z nich vyplývajícími závěry.
Následně byl přečten posudek vedoucí práce a oponentský posudek. Studentka zodpověděla dotazy položené v posudku oponenta. Odpověděla také na dotazy členů zkušební komise:
prof. Šebela: Kolik vzorků jste zpracovala pro měření? Jakou metodou jste měřila koncentrace léčiv? Jakým způsobem můžete garantovat, že koncentrace je přesně 501 jednotek a nikoliv například 499 jednotek?
doc. Luhová: Používá se již prezentovaná metoda v praxi? Plánujete v dané problematice pokračovat?