Informace o kvalifikační práci Aktivace aryluhlovodíkového receptoru fluorovanými deriváty indolu a dopad na aktivitu androgenového receptoru v nádorové prostatické linii 22Rv1
Tato diplomová práce se zabývá působením fluorovaných derivátů indolu na aryluhlovodíkový receptor (AhR) a jeho následným dopadem na aktivitu androgenního receptoru (AR) v buňkách nádorové prostatické linie 22Rv1. V první kapitole teoretické části je popsána problematika rakoviny prostaty od jejích mechanismů, po diagnostiku a léčbu. Následující dvě kapitoly jsou věnovány AhR a AR. Poslední kapitola se pak zaměřuje na výskyt a funkce indolů. V experimentální části byla po vystavení buněk testovaným látkám stanovena aktivita AhR a AR metodou reporter gene assay, hladina exprese cílových genů AhR a AR metodou qPCR a detekována hladina proteinů AhR a AR metodou western blotting.
Anotace v angličtině
This diploma thesis deals with the exposure of fluorinated indole derivatives on the aryl hydrocarbon receptor (AhR) and its subsequent impact on the activity of the androgen receptor (AR) in cells of the prostate tumor line 22Rv1. In the first chapter of the theoretical part, the problematics of prostate cancer is described, from its mechanisms to diagnostics and treatment. The next two chapters are devoted to AhR and AR. The last chapter then focuses on the occurrence and functions of indoles. In the experimental part, after exposure of the cells to the tested substances, the activity of AhR and AR was determined by the reporter gene assay, the level of expression of AhR and AR target genes by the qPCR method, and the level of AhR and AR proteins was detected by the western blotting.
Klíčová slova
rakovina prostaty, AhR, AR, fluorindoly, 22Rv1
Klíčová slova v angličtině
prostate cancer, AhR, AR, fluoroindoles, 22Rv1
Rozsah průvodní práce
58
Jazyk
CZ
Anotace
Tato diplomová práce se zabývá působením fluorovaných derivátů indolu na aryluhlovodíkový receptor (AhR) a jeho následným dopadem na aktivitu androgenního receptoru (AR) v buňkách nádorové prostatické linie 22Rv1. V první kapitole teoretické části je popsána problematika rakoviny prostaty od jejích mechanismů, po diagnostiku a léčbu. Následující dvě kapitoly jsou věnovány AhR a AR. Poslední kapitola se pak zaměřuje na výskyt a funkce indolů. V experimentální části byla po vystavení buněk testovaným látkám stanovena aktivita AhR a AR metodou reporter gene assay, hladina exprese cílových genů AhR a AR metodou qPCR a detekována hladina proteinů AhR a AR metodou western blotting.
Anotace v angličtině
This diploma thesis deals with the exposure of fluorinated indole derivatives on the aryl hydrocarbon receptor (AhR) and its subsequent impact on the activity of the androgen receptor (AR) in cells of the prostate tumor line 22Rv1. In the first chapter of the theoretical part, the problematics of prostate cancer is described, from its mechanisms to diagnostics and treatment. The next two chapters are devoted to AhR and AR. The last chapter then focuses on the occurrence and functions of indoles. In the experimental part, after exposure of the cells to the tested substances, the activity of AhR and AR was determined by the reporter gene assay, the level of expression of AhR and AR target genes by the qPCR method, and the level of AhR and AR proteins was detected by the western blotting.
Klíčová slova
rakovina prostaty, AhR, AR, fluorindoly, 22Rv1
Klíčová slova v angličtině
prostate cancer, AhR, AR, fluoroindoles, 22Rv1
Zásady pro vypracování
1) Vypracování rešerše na téma diplomové práce
2) Stanovení aktivity aryluhlovodíkového (AhR) a androgenního receptoru (AR) v linii 22Rv1 metodou reporter gene assay
3) Stanovení hladiny exprese cílových genů AhR a AR v prostatické linii 22Rv1
4) Detekce hladiny proteinů AhR a AR metodou western blotting
5) Vypracování diplomové práce a multimediální prezentace k obhajobě diplomové práce
Závěrečná práce bude vypracována v souladu s doporučeným stylem pro závěrečné práce studijního programu Biotechnologie a genové inženýrství PřF UP uvedeným na webové stránce Katedry biotechnologií (http://kbt.upol.cz/).
Práce bude studentem pouze vložena v elektronické podobě ve formátu PDF do systému STAG a doplněna povinnými údaji o své práci (viz Vnitřní norma UP č. R-B - 17/08-ÚZ01 ).
Pokud na základě žádosti bude závěrečná práce v systému Stag nezveřejněná , student odevzdá jeden svázaný výtisk ve stanoveném termínu na sekretariátu Katedry biotechnologií.
Zásady pro vypracování
1) Vypracování rešerše na téma diplomové práce
2) Stanovení aktivity aryluhlovodíkového (AhR) a androgenního receptoru (AR) v linii 22Rv1 metodou reporter gene assay
3) Stanovení hladiny exprese cílových genů AhR a AR v prostatické linii 22Rv1
4) Detekce hladiny proteinů AhR a AR metodou western blotting
5) Vypracování diplomové práce a multimediální prezentace k obhajobě diplomové práce
Závěrečná práce bude vypracována v souladu s doporučeným stylem pro závěrečné práce studijního programu Biotechnologie a genové inženýrství PřF UP uvedeným na webové stránce Katedry biotechnologií (http://kbt.upol.cz/).
Práce bude studentem pouze vložena v elektronické podobě ve formátu PDF do systému STAG a doplněna povinnými údaji o své práci (viz Vnitřní norma UP č. R-B - 17/08-ÚZ01 ).
Pokud na základě žádosti bude závěrečná práce v systému Stag nezveřejněná , student odevzdá jeden svázaný výtisk ve stanoveném termínu na sekretariátu Katedry biotechnologií.
Seznam doporučené literatury
1) Methylindoles and Methoxyindoles are Agonists and Antagonists of Human Aryl Hydrocarbon Receptor; Martina Stepankova et al., Molecular Pharmacology, 2018
2) Roles of indole as an interspecies and interkingdom signaling molecule. Lee JH et al., Trends in microbiology, 2015
3) A novel prostate cancer therapeutic strategy using icaritin-activated arylhydrocarbon-receptor to co-target androgen receptor and its splice variants. Sun F et al., Carcinogenesis, 2015
4) Carbidopa suppresses prostate cancer via aryl hydrocarbon receptor-mediated ubiquitination and degradation of androgen receptor. Zhiwei Chen et al., Oncogenesis, 2020
5) A Molecular Mechanism To Switch the Aryl Hydrocarbon Receptor from a Transcription Factor to an E3 Ubiquitin Ligase. Sandra Luecke-Johansson et al., Molecular and cellular Biology, 2017
Seznam doporučené literatury
1) Methylindoles and Methoxyindoles are Agonists and Antagonists of Human Aryl Hydrocarbon Receptor; Martina Stepankova et al., Molecular Pharmacology, 2018
2) Roles of indole as an interspecies and interkingdom signaling molecule. Lee JH et al., Trends in microbiology, 2015
3) A novel prostate cancer therapeutic strategy using icaritin-activated arylhydrocarbon-receptor to co-target androgen receptor and its splice variants. Sun F et al., Carcinogenesis, 2015
4) Carbidopa suppresses prostate cancer via aryl hydrocarbon receptor-mediated ubiquitination and degradation of androgen receptor. Zhiwei Chen et al., Oncogenesis, 2020
5) A Molecular Mechanism To Switch the Aryl Hydrocarbon Receptor from a Transcription Factor to an E3 Ubiquitin Ligase. Sandra Luecke-Johansson et al., Molecular and cellular Biology, 2017
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
ilustrace, grafy, schémata, tabulky
Převzato z knihovny
Ne
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Průběh obhajoby:
V úvodu obhajoby předseda komise prof. RNDr. Jozef Šamaj DrSc. představil studentku přítomným akademickým pracovníkům a hostům. V rámci prezentace své práce studentka seznámila všechny zúčastněné s cíli práce a hlavními metodami využitými při jejím zpracování, dále se získanými výsledky a z nich vyplývajícími závěry.
Následně byl přečten posudek vedoucího práce a oponentní posudek. Odpovědi na otázky a připomínky uvedené v posudku vedoucího bakalářské práce a oponenta studentka zodpověděla.
V rámci veřejné diskuse student zodpověděl následující dotazy položené přítomnými odborníky:
prof. RNDr. Jozef Šamaj DrSc: Jak jste docílili stejných nanášek proteinů na gelu při western blottingu?
doc. Ing. Tomáš Takáč, Ph.D.: Navrhněte experimentální postup, který by vyřešil přímé funkční propojení AR a AhR?