Thesis info Optimalizace in vitro modelu cholinergních neuronů odvozených z glioblastomové linie U-87MG: skopolaminem indukovaná degenerace a testování neuroprotektivní aktivity
- All mandatory fields for this Thesis are filled in.
Main topic
Optimalizace in vitro modelu cholinergních neuronů odvozených z glioblastomové linie U87MG: skopolaminem indukovaná degenerace a testování neuroprotektivní aktivity
Main topic in English
Optimization of a in vitro model of cholinergic neurons derived from the glioblastoma cell line U87MG: scopolamine-induced degeneration and testing of neuroprotective activity
Title according to student
Optimalizace in vitro modelu cholinergních neuronů odvozených z glioblastomové linie U-87MG: skopolaminem indukovaná degenerace a testování neuroprotektivní aktivity
English title as given by the student
Optimization of a in vitro model of cholinergic neurons derived from the glioblastoma cell line U-87MG: scopolamine-induced degeneration and testing of neuroprotective activity
Celá řada neurodegenerativních chorob, jako je Parkinsonova a Alzheimerova choroba, zahrnuje poškození cholinergních neuronů. Studium těchto onemocnění je vázáno na zvířecí a buněčné modely. In vitro modely disponují celou řadou výhod, ovšem v případě cholinergních neuronů jsou založeny téměř výhradně na primárních kulturách, které s sebou přinášejí řadu omezení. Tato práce má za cíl optimalizovat in vitro model cholinergních neuronů odvozených od glioblastomové linie U-87MG, optimalizovat na tomto modelu skopolaminem indukovanou toxicitu a testovat neuroprotektivitu vybraných látek. Vše v porovnání s již zavedeným modelem cholinergních neuronů, buněčnou linií SH-SY5Y diferenciovanou pomocí all-trans kyseliny retinové. K diferenciaci linie U-87MG na cholinergní fenotyp slouží butyrát sodný.
Annotation in English
A number of neurodegenerative diseases such as Parkinson's and Alzheimer's disease involve damage of cholinergic neurons. The study of these diseases is committed to animal and cellular models. In vitro models have a number of advantages, but in the case of cholinergic neurons, they are based almost exclusively on primary culture which bring several limitations. This work aims to optimize an in vitro model of cholinergic neurons derived from the glioblastoma line U-87MG, to optimize scopolamine-induced toxicity on this model and to test the neuroprotection of selected substances. Everything will be compared to an already established model of cholinergic neurons, the SH-SY5Y cell line differentiated with all-trans retinoic acid. Sodium butyrate is used to differentiate the U-87MG line into a cholinergic phenotype.
Celá řada neurodegenerativních chorob, jako je Parkinsonova a Alzheimerova choroba, zahrnuje poškození cholinergních neuronů. Studium těchto onemocnění je vázáno na zvířecí a buněčné modely. In vitro modely disponují celou řadou výhod, ovšem v případě cholinergních neuronů jsou založeny téměř výhradně na primárních kulturách, které s sebou přinášejí řadu omezení. Tato práce má za cíl optimalizovat in vitro model cholinergních neuronů odvozených od glioblastomové linie U-87MG, optimalizovat na tomto modelu skopolaminem indukovanou toxicitu a testovat neuroprotektivitu vybraných látek. Vše v porovnání s již zavedeným modelem cholinergních neuronů, buněčnou linií SH-SY5Y diferenciovanou pomocí all-trans kyseliny retinové. K diferenciaci linie U-87MG na cholinergní fenotyp slouží butyrát sodný.
Annotation in English
A number of neurodegenerative diseases such as Parkinson's and Alzheimer's disease involve damage of cholinergic neurons. The study of these diseases is committed to animal and cellular models. In vitro models have a number of advantages, but in the case of cholinergic neurons, they are based almost exclusively on primary culture which bring several limitations. This work aims to optimize an in vitro model of cholinergic neurons derived from the glioblastoma line U-87MG, to optimize scopolamine-induced toxicity on this model and to test the neuroprotection of selected substances. Everything will be compared to an already established model of cholinergic neurons, the SH-SY5Y cell line differentiated with all-trans retinoic acid. Sodium butyrate is used to differentiate the U-87MG line into a cholinergic phenotype.
Literární rešerše zahrnující: 1) Onemocnění související s degenerací cholinergních neuronů; 2) možnosti studia cholinergních neuronů a buněčné modely; 3) buněčná linie U78MG a možnosti diferenciace na cholinergní D-87 neuronální fenotyp; 4) skopolaminem-indukovaný model kognitivního poškození.
Experimentální část: Optimalizace práce na 1) kultivaci, 2) diferenciaci U87MG na D-87 fenotyp, 3) fluorescenční mikroskopie a 4) použité koncentrace skopolaminu pro indukci optimální buněčné smrti s testováním neuroprotektivní aktivity.
Research Plan
Literární rešerše zahrnující: 1) Onemocnění související s degenerací cholinergních neuronů; 2) možnosti studia cholinergních neuronů a buněčné modely; 3) buněčná linie U78MG a možnosti diferenciace na cholinergní D-87 neuronální fenotyp; 4) skopolaminem-indukovaný model kognitivního poškození.
Experimentální část: Optimalizace práce na 1) kultivaci, 2) diferenciaci U87MG na D-87 fenotyp, 3) fluorescenční mikroskopie a 4) použité koncentrace skopolaminu pro indukci optimální buněčné smrti s testováním neuroprotektivní aktivity.
Recommended resources
Honghui Liu, Jinye Xia, Tiansheng Wang, Wei Li, Yexun Song, Guolin Tan. (2019). "Differentiation of human glioblastoma U87 cells into cholinergic neuron." Neuroscience Letters; 704: 1-7.
B. Han, X. Li, J. Hao. (2017). "The cholinergic anti-inflammatory pathway: an innovative treatment strategy for neurological diseases." Neuroscience & Biobehavioral Reviews., 77, pp. 358-368.
T.T. Wang, A.H. Jing, X.Y. Luo, M. Li, Y. Kang, X.L. Zou, H. Chen, J. Dong, S. Liu. (2006). "Neural stem cells: isolation and differentiation into cholinergic neurons." Neuroreport, 17, pp. 1433-1436.
Wang, B., Zhong, Y., Gao, C., & Li, J. (2017). "Myricetin ameliorates scopolamine-induced memory impairment in mice via inhibiting acetylcholinesterase and down-regulating brain iron." Biochemical and Biophysical Research Communications, 490(2), 336–342.
Recommended resources
Honghui Liu, Jinye Xia, Tiansheng Wang, Wei Li, Yexun Song, Guolin Tan. (2019). "Differentiation of human glioblastoma U87 cells into cholinergic neuron." Neuroscience Letters; 704: 1-7.
B. Han, X. Li, J. Hao. (2017). "The cholinergic anti-inflammatory pathway: an innovative treatment strategy for neurological diseases." Neuroscience & Biobehavioral Reviews., 77, pp. 358-368.
T.T. Wang, A.H. Jing, X.Y. Luo, M. Li, Y. Kang, X.L. Zou, H. Chen, J. Dong, S. Liu. (2006). "Neural stem cells: isolation and differentiation into cholinergic neurons." Neuroreport, 17, pp. 1433-1436.
Wang, B., Zhong, Y., Gao, C., & Li, J. (2017). "Myricetin ameliorates scopolamine-induced memory impairment in mice via inhibiting acetylcholinesterase and down-regulating brain iron." Biochemical and Biophysical Research Communications, 490(2), 336–342.