Tato bakalářská práce se zabývá vývojem a základní charakterizací buněčných linií rezistentních k CuET. V teoretické části je popsána léková rezistence se zaměřením na mnohočetnou lékovou rezistenci a mechanismus jejího vzniku. Dále jsou popsány rakovinné buňky jako model ve výzkumu léků, větší pozornost pak byla věnována myším modelům. Nakonec byla popsána samotná látka zvaná CuET, u které byly prokázány protirakovinné účinky. Experimentální část se zaměřuje na selekci rakovinných buněk rezistentních k CuET. U rezistentních i nerezistentních linií se stanovovala střední inhibiční koncentrace (IC50) pomocí MTS testu cytotoxicity. Dále byly linie testovány pro stanovení exprese P-glykoproteinu a MRP1 proteinu.
Anotace v angličtině
This bachelor thesis deals with the development and basic characterization of cell lines resistant to CuET. The theoretical part describes drug resistance with a focus on multiple drug resistance and the mechanism of its development. Furthermore, cancer cells are described as a model in drug research, and more attention was paid to mouse models. Finally, a substance called CuET itself has been described, which has been shown to have anti-cancer effects. The experimental part focuses on the selection of CuET-resistant cancer cells. For both resistant and non-resistant lines, the mean inhibitory concentration (IC50) was determined using the MTS cytotoxicity assay. Next, the lines were tested to determine the expression of P glycoprotein and MRP1 protein.
Klíčová slova
disulfiram, mnohočetná léková rezistence
Klíčová slova v angličtině
disulfiram, multi-drug resistance
Rozsah průvodní práce
ix s., 39 s. (73 426 znaků)
Jazyk
CZ
Anotace
Tato bakalářská práce se zabývá vývojem a základní charakterizací buněčných linií rezistentních k CuET. V teoretické části je popsána léková rezistence se zaměřením na mnohočetnou lékovou rezistenci a mechanismus jejího vzniku. Dále jsou popsány rakovinné buňky jako model ve výzkumu léků, větší pozornost pak byla věnována myším modelům. Nakonec byla popsána samotná látka zvaná CuET, u které byly prokázány protirakovinné účinky. Experimentální část se zaměřuje na selekci rakovinných buněk rezistentních k CuET. U rezistentních i nerezistentních linií se stanovovala střední inhibiční koncentrace (IC50) pomocí MTS testu cytotoxicity. Dále byly linie testovány pro stanovení exprese P-glykoproteinu a MRP1 proteinu.
Anotace v angličtině
This bachelor thesis deals with the development and basic characterization of cell lines resistant to CuET. The theoretical part describes drug resistance with a focus on multiple drug resistance and the mechanism of its development. Furthermore, cancer cells are described as a model in drug research, and more attention was paid to mouse models. Finally, a substance called CuET itself has been described, which has been shown to have anti-cancer effects. The experimental part focuses on the selection of CuET-resistant cancer cells. For both resistant and non-resistant lines, the mean inhibitory concentration (IC50) was determined using the MTS cytotoxicity assay. Next, the lines were tested to determine the expression of P glycoprotein and MRP1 protein.
Klíčová slova
disulfiram, mnohočetná léková rezistence
Klíčová slova v angličtině
disulfiram, multi-drug resistance
Zásady pro vypracování
Teoretická část práce bude zaměřena na problematiku lékové rezistence v onkologické léčbě a aktuální trendy v jejím výzkumu. Pozornost bude věnována zejména disulfiramu, který je pod svým obchodním názvem Antabus, prodáván již celou řadu let a v poslední době se u něj prokázaly protirakovinné účinky, za které odpovídá metabolit CuET. Praktická část práce bude zaměřena na selekci rakovinných buněk rezistentních k CuET. Rezistence těchto buněk bude ověřena MTS testem cytotoxicity a následně bude provedena základní charakterizace buněk.
Zásady pro vypracování
Teoretická část práce bude zaměřena na problematiku lékové rezistence v onkologické léčbě a aktuální trendy v jejím výzkumu. Pozornost bude věnována zejména disulfiramu, který je pod svým obchodním názvem Antabus, prodáván již celou řadu let a v poslední době se u něj prokázaly protirakovinné účinky, za které odpovídá metabolit CuET. Praktická část práce bude zaměřena na selekci rakovinných buněk rezistentních k CuET. Rezistence těchto buněk bude ověřena MTS testem cytotoxicity a následně bude provedena základní charakterizace buněk.
Seznam doporučené literatury
Dagogo-Jack I, Shaw AT. Tumour heterogeneity and resistance to cancer therapis. Nature Reviews Clinical Oncology. 2018. volume 15, 81-94
Skrott Z., Mistrik M etc. Alcohol-abuse drug disulfiram targets cancer via p97 segregase adapter NPL4. Nature. 2017 Dec 14; 552(7684): 194-199.
Gillet JP, Gottesman MM. Mechanism of multidrug resistance in cancer. Methods Mol Biol. 2010; 596:47-76
Seznam doporučené literatury
Dagogo-Jack I, Shaw AT. Tumour heterogeneity and resistance to cancer therapis. Nature Reviews Clinical Oncology. 2018. volume 15, 81-94
Skrott Z., Mistrik M etc. Alcohol-abuse drug disulfiram targets cancer via p97 segregase adapter NPL4. Nature. 2017 Dec 14; 552(7684): 194-199.
Gillet JP, Gottesman MM. Mechanism of multidrug resistance in cancer. Methods Mol Biol. 2010; 596:47-76
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ano
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Obhajobu bakalářské práce studentky Venduly Klibrové zahájil prof. RNDr. Zdeněk Dvořák, DrSc. et Ph.D. Studentka seznámila komisi s hlavními částmi a výsledky své práce. Následovalo přečtení posudku vedoucí práce Mgr. Lenky Řeháčkové a oponenta Mgr. Tomáše Oždiana, Ph.D.
Studentka pak reagovala na připomínky a dotazy.
Prezentace studentky obsahovala tato témata:
- CuET - metabolit disulfiramu, užití, redukce na DDTC v těle
- Účinky disulfiramu
- Rezistence nádorových buněk na léčiva
- Experimentální provedení práce
V rozpravě byly uvedeny následující připomínky či nastoleny tyto problémy:
- Nekvalitní literární rešerše, citování učebnice Alberts a kol. z roku 2002
- Formalní a obsahová slabá úroveň práce
- Vliv disulfiramu na nádory a jeho zařazení mezi protinádorová léčiva
- Nádorová heterogenita
- Pojem "výrazně přerostlé adherentní buňky"
- Interpretace dat z průtokového cytometru
- Disulfiram a jeho chybně uváděná interkalační aktivita
- Stanovení hladiny exprese glykoproteinu průtokovou cytometrií
Studentka na dotazy položené oponentem práce a členy komise reagovala přiměřeně.