Tato diplomová práce se zabývá studiem stanovení rozdělovacích koeficientů fenolických látek přírodního původu v systému liposom - voda. Hodnoty rozdělovacího koeficientu byly stanoveny modifikovanou metodou rovnovážné dialýzy za využití vyrobené rozdělovací aparatury. Koncentrace studovaných látek v roztocích byly analyzovány plynovou chromatografií ve spojení s hmotnostní spektrometrií. Analýze předcházela derivatizace hydroxylových skupin studovaných látek za účelem zlepšení detekčních limitů a zvýšení robustnosti metody. Metoda pro stanovení rozdělovacích koeficientů byla optimalizována a aplikována při stanovení rozdělovacích koeficientů eugenolu, thymolu a karvakrolu. Výsledné hodnoty byly porovnány s hodnotami určenými pro stejné vzorky pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie a diferenční pulzní voltametrie. Hodnoty rozdělovacích koeficientů nalezené třemi různými technikami se pohybují v intervalu 120-1100 (log K = 2,09-3,04) a dobře korespondují s hodnotami uvedenými v literatuře.
Anotace v angličtině
This Master's thesis deals with the study of determination of partition coefficients in the liposome - water system for phenolic compounds commonly found in the nature. The values of partition coefficients were determinated by modified equilibrium dialysis method with the use of self-made partitioning apparatus. The concentration of analysed compounds in the solution was examined by gas chromatography with mass spectrometry. Before that, derivatization of hydroxyl parts was performed in order to improve detection limits and robustness of the method. The method for determination of partition coefficients was optimized and applied for determining partition coefficients of eugenol, thymol and carvacrol. Results were compared with values from the same sample solution obtained by high-performance liquid chromatography and differential pulse voltammetry. The values of partition coefficients obtained by these three techniques are found in interval 120-1100 (log K = 2,09-3,04). These values agree well with values found in the literature.
partition coefficient, gas chromatography, liposomes, eugenol, thymol, carvacrol, asolectin
Rozsah průvodní práce
64 s.
Jazyk
CZ
Anotace
Tato diplomová práce se zabývá studiem stanovení rozdělovacích koeficientů fenolických látek přírodního původu v systému liposom - voda. Hodnoty rozdělovacího koeficientu byly stanoveny modifikovanou metodou rovnovážné dialýzy za využití vyrobené rozdělovací aparatury. Koncentrace studovaných látek v roztocích byly analyzovány plynovou chromatografií ve spojení s hmotnostní spektrometrií. Analýze předcházela derivatizace hydroxylových skupin studovaných látek za účelem zlepšení detekčních limitů a zvýšení robustnosti metody. Metoda pro stanovení rozdělovacích koeficientů byla optimalizována a aplikována při stanovení rozdělovacích koeficientů eugenolu, thymolu a karvakrolu. Výsledné hodnoty byly porovnány s hodnotami určenými pro stejné vzorky pomocí vysokoúčinné kapalinové chromatografie a diferenční pulzní voltametrie. Hodnoty rozdělovacích koeficientů nalezené třemi různými technikami se pohybují v intervalu 120-1100 (log K = 2,09-3,04) a dobře korespondují s hodnotami uvedenými v literatuře.
Anotace v angličtině
This Master's thesis deals with the study of determination of partition coefficients in the liposome - water system for phenolic compounds commonly found in the nature. The values of partition coefficients were determinated by modified equilibrium dialysis method with the use of self-made partitioning apparatus. The concentration of analysed compounds in the solution was examined by gas chromatography with mass spectrometry. Before that, derivatization of hydroxyl parts was performed in order to improve detection limits and robustness of the method. The method for determination of partition coefficients was optimized and applied for determining partition coefficients of eugenol, thymol and carvacrol. Results were compared with values from the same sample solution obtained by high-performance liquid chromatography and differential pulse voltammetry. The values of partition coefficients obtained by these three techniques are found in interval 120-1100 (log K = 2,09-3,04). These values agree well with values found in the literature.
partition coefficient, gas chromatography, liposomes, eugenol, thymol, carvacrol, asolectin
Zásady pro vypracování
1) Prostudování odborné literatury k tématu diplomové práce.
2) Vypracování literární rešerše zaměřené na popis rozdělovacích rovnovah a metody jejich studia.
3) Výběr vhodných cílových látek a metod jejich analýzy.
4) Zpracování teoretické části diplomové práce zahrnující teoretický popis rozdělovacích rovnovah, metod jejich studia, charakterizaci vybraných cílových látek a konkrétní metody a postupy vhodné pro analýzu zvolených látek
5) Návrh, provedení a interpretace potřebných experimentů, zpracování experimentálních dat a příprava experimentální a diskusní části diplomové práce
6) Příprava multimediální prezentace k obhajobě diplomové práce.
Zásady pro vypracování
1) Prostudování odborné literatury k tématu diplomové práce.
2) Vypracování literární rešerše zaměřené na popis rozdělovacích rovnovah a metody jejich studia.
3) Výběr vhodných cílových látek a metod jejich analýzy.
4) Zpracování teoretické části diplomové práce zahrnující teoretický popis rozdělovacích rovnovah, metod jejich studia, charakterizaci vybraných cílových látek a konkrétní metody a postupy vhodné pro analýzu zvolených látek
5) Návrh, provedení a interpretace potřebných experimentů, zpracování experimentálních dat a příprava experimentální a diskusní části diplomové práce
6) Příprava multimediální prezentace k obhajobě diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
1) Vlastní rešerše (Web of Science, Chemical Abstracts)
2) Sledování původní časopisecké literatury
3) Další literatura dle doporučení vedoucího diplomové práce.
Seznam doporučené literatury
1) Vlastní rešerše (Web of Science, Chemical Abstracts)
2) Sledování původní časopisecké literatury
3) Další literatura dle doporučení vedoucího diplomové práce.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ano
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Studentka představila komisi svoji diplomovou práci na téma Stanovení rozdělovacích koeficientů v systému liposom - voda plynovou chromatografií. Na úvod seznámila přítomné se zaměřením své práce, teorií rozdělovacích koeficientů a jejich experimentálním stanovením. Prezentovala již zavedené metody pro stanovení rozdělovacích koeficientů. Představila navrženou aparaturu pro stanovení rozdělovacích koeficientů, proces její výroby a následné využití. Následně prezentovala analytickou metodu použitou v experimentální části pro analýzu vzorků. Představila optimalizační postupy pro plynovou chromatografii a stanovení rozdělovacích koeficientů. Prezentovala dosažené výsledky stanovení rozdělovacích koeficientů pro vybrané analyty s vybranými membránami. Dosažené výsledky porovnala s výsledky uvedenými v pracích spolužáků, kteří stanovovali rozdělovací koeficienty stejných vzorků odlišnými metodami. Prezentovala opravený graf, který v práci uvedla špatně a nesrovnalosti vysvětlila. Na závěr dosažené výsledky kriticky zhodnotila ve srovnání s literaturou a diskutovala rozdílnosti.
Vedoucí práce shrnul obsah práce a vyzdvihnul zavedení metody izolace cílových látek pomocí disperzní mikroextrakce do tetrachlormethanu s následnou přímou derivatizací. Ocenil náročnost práce a soudržnost řešitelského týmu, který byl složen ze tří studentů, přičemž z celého projektu vzešly tři diplomové práce. K práci neměl žádné dotazy a doporučil ji k obhajobě.
Oponentka shrnula obsah a formální stránku práce. Ocenila dosažené výsledky a jejich přehlednou prezentaci v práci. Vyzdvihla gramatickou stránku práce. Ocenila přínos práce pro další vývoj analytických metod, zejména pak pro studium rozdělovacích rovnovah dalších biologicky aktivních substancí. Položila studentce tři dotazy: Na str. 18 nahoře se uvádí, že k laboratorní přípravě liposomů se "nejčastěji využívá neutrální fosfatidylcholin, nebo záporně nabitá kyselina fosfatidová, fosfatidylglycerol, fosfatidylcholin nebo fosfatidyletanolamin". Mohla by autorka upřesnit, jak je to s nábojem u posledních tří jmenovaných fosfolipidů? Jak vypadaly kalibrační závislosti použité k určení koncentrace příslušného fenolu ve vodné fázi a následně k výpočtu rozdělovacího koeficientu? Uveďte prosím příklad. Jaká byla mez stanovitelnosti těchto látek? Kterou ze dvou použitých membrán (celulosová a nylonová) by autorka doporučila používat pro stanovení rozdělovacích koeficientů a proč? Studentka na položené dotazy uspokojivě odpověděla. Práce byla doporučena k obhajobě.
Při veřejné diskuzi byly položeny následující dotazy: Proč byly zvoleny zrovna tyto analyty? Byly ve spektrech vidět další složky, které při derivatizaci vznikají? Studentka adekvátně reagovala a dotazy zodpověděla.
Celkové hodnocení obhajované práce: A