Tato práce se zabývá reaktivními formami kyslíku. Nadměrná tvorba reaktivních forem kyslíku může být pro buňky nebezpečná, z tohoto důvodu je třeba studovat jejich mechanismus působení v buňce. Cílem této práce byla tvorba kyslíkových organických radikálů na buněčné kultuře U937 pomocí působení azo iniciátoru. K detekci kyslíkových organických radikálů byla použita elektronová paramagnetická rezonanční spektroskopie. Pomocí metody spinových pastí byl detekován komplex spinové pasti a alkoxylového radikálu, který pocházel z oxidace membránových proteinů. V diskuzi byly formulovány důvody, proč
se jedná o alkoxylový radikál proteinového původu a také bylo navrženo možné navázání na tuto práci.
Anotace v angličtině
The present thesis deals with reactive oxygen species. Excessive formation of reactive oxygen species can
be dangerous for cells therefore it is necessary to study their mechanism of action in the cell. The aim of this study was the formation of oxygen-centred organic radical on the cell culture U937 by degradation of azo initiator. For the detection of oxygen-centred radical, electron paramagnetic resonance spectroscopy was used. Using a spin trapping method, a complex of spin trap and alkoxyl radical, which originated from the oxidation of membrane proteins, was detected. In the discussion section, it is explained why this is case of alkoxyl radical of protein origin. The section also contains suggestions for further research.
Klíčová slova
Reaktivní formy kyslíku, peroxylový radikál, alkoxylový radikál, oxidace proteinů, EPR spektroskopie, buněčná kultura U937
Tato práce se zabývá reaktivními formami kyslíku. Nadměrná tvorba reaktivních forem kyslíku může být pro buňky nebezpečná, z tohoto důvodu je třeba studovat jejich mechanismus působení v buňce. Cílem této práce byla tvorba kyslíkových organických radikálů na buněčné kultuře U937 pomocí působení azo iniciátoru. K detekci kyslíkových organických radikálů byla použita elektronová paramagnetická rezonanční spektroskopie. Pomocí metody spinových pastí byl detekován komplex spinové pasti a alkoxylového radikálu, který pocházel z oxidace membránových proteinů. V diskuzi byly formulovány důvody, proč
se jedná o alkoxylový radikál proteinového původu a také bylo navrženo možné navázání na tuto práci.
Anotace v angličtině
The present thesis deals with reactive oxygen species. Excessive formation of reactive oxygen species can
be dangerous for cells therefore it is necessary to study their mechanism of action in the cell. The aim of this study was the formation of oxygen-centred organic radical on the cell culture U937 by degradation of azo initiator. For the detection of oxygen-centred radical, electron paramagnetic resonance spectroscopy was used. Using a spin trapping method, a complex of spin trap and alkoxyl radical, which originated from the oxidation of membrane proteins, was detected. In the discussion section, it is explained why this is case of alkoxyl radical of protein origin. The section also contains suggestions for further research.
Klíčová slova
Reaktivní formy kyslíku, peroxylový radikál, alkoxylový radikál, oxidace proteinů, EPR spektroskopie, buněčná kultura U937
1) Vypracujte literární rešerši na dané téma
- Tvorba ROS v bílých krvinkách
- Detekce ROS pomocí EPR a elektrochemických metod
2) Zvládněte následující metodiku
- Pěstování buněčných kultur bílých krvinek
- Měření ROS pomocí EPR a elektrochemických metod
3) Změřte tvorbu ROS v THP-1 monocytech
4) Vyhodnoťte naměřené výsledky a diskutujte v porovnání s literaturou
5) Sepište bakalářskou práci
Zásady pro vypracování
1) Vypracujte literární rešerši na dané téma
- Tvorba ROS v bílých krvinkách
- Detekce ROS pomocí EPR a elektrochemických metod
2) Zvládněte následující metodiku
- Pěstování buněčných kultur bílých krvinek
- Měření ROS pomocí EPR a elektrochemických metod
3) Změřte tvorbu ROS v THP-1 monocytech
4) Vyhodnoťte naměřené výsledky a diskutujte v porovnání s literaturou
5) Sepište bakalářskou práci
Seznam doporučené literatury
Halliwell, B. & Gutteridge, J. Free Radicals in Biology and Medicine, Ed 4 (Oxford University Press, 2007).
Bedard K, Krause, K-H. The NOX Family of ROS-Generating NADPH Oxidases: Physiology and Pathophysiology. Physiol Rev 87: 245-313, 2007;
Prasad A, Kikuchi H, Inoue KY, Suzuki M, Sugiura Y, Sugai T, Tomonori A, Tada M, Kobayashi
M, Matsue T and Kasai S (2016) Simultaneous real-time monitoring of oxygen consumption and hydrogen peroxide production in cells using our newly developed chip-type biosensor device. Front. Physiol. 7:109.
Seznam doporučené literatury
Halliwell, B. & Gutteridge, J. Free Radicals in Biology and Medicine, Ed 4 (Oxford University Press, 2007).
Bedard K, Krause, K-H. The NOX Family of ROS-Generating NADPH Oxidases: Physiology and Pathophysiology. Physiol Rev 87: 245-313, 2007;
Prasad A, Kikuchi H, Inoue KY, Suzuki M, Sugiura Y, Sugai T, Tomonori A, Tada M, Kobayashi
M, Matsue T and Kasai S (2016) Simultaneous real-time monitoring of oxygen consumption and hydrogen peroxide production in cells using our newly developed chip-type biosensor device. Front. Physiol. 7:109.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ano
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Student seznámil členy komise a veřejnost s výsledky své bakalářské práce v úvodní cca 20 minutové power-pointové prezentaci. Poté byly přečteny posudky vedoucího práce a oponenta. Student odpověděl na dotazy a připomínky uvedené v posudcích. Členové komise položili řadu dotazů, na které student odpověděl.