V této práci jsme se zaměřili na roli jadérka v buňce. Zkoumali jsme jeho strukturu, indukci
nukleárního stresu a jeho účinky. Dále jsme se zabývali DBA, což je vrozená anémie mající
původ v aberacích ribozomálních proteinů a jejíž léčba je většinou založena na
kortikosteroidech.
Prvním aspektem této studie bylo popsání vlivu L-OHP a mutace v RPS7 proteinu na strukturu
jadérek. Zjistili jsme, že struktura jadérek je důležitým faktorem ribozomálního stresu a může
být použita pro jeho hodnocení. Dále jsme se zaměřili na roli strukturního proteinu jadérka
BYSL (kódovaným genem Bystin) na fenotyp DBA. Identifikovali jsme bystin jako první možný
gen modifikující onemocnění DBA. Dále jsme zjistili, že bystin řídí patologii DBA
prostřednictvím regulace c-Mycu skrze přímou interakci. Dále jsme prokázali, že bystin je
molekulárním cílem terapie DBA glukokortikoidy. Toto zjištění může vést k vývoji nové terapie
pro DBA pacienty bez závažných vedlejších účinků glukokortikoidů.
Anotace v angličtině
In this work, we focused on the role of the nucleolus in the cell. We explored its structure,
nucleolar stress induction, and its effects. Furthermore, we have explored molecular
pathogenesis of Diamond-Blackfan anemia (DBA), which is congenital anemia originating in
ribosomal proteins aberration, and it is usually treated by glucocorticosteroids.
The first aspect of this study was to estimate the impact of oxaliplatin (L-OHP) and RPS7
mutation on the structure of nucleoli. We revealed that nucleoli structure is an essential factor
in ribosomal stress and can be used for its evaluation. Next, we focused on the role of nucleoli
structure protein BYSL (encoded by Bystin gene) in the DBA phenotype. We employed
biochemical, molecular biology and in silico modelling methods and observed the details of
BYSL behaviour and interaction with the other proteins and investigated bystin targeting by
small molecules. In summary, we have identified bystin as the first disease-modifying gene in
DBA. Mutation of bystin gene improves DBA phenotype and thus it is interesting molecular
target. Furthermore, we determined that bystin improves DBA pathology through c-Myc
regulation via direct interaction. We also proved that bystin is targeted by routinely used
glucocorticosteroid therapy in DBA. This finding may lead to development of novel class of
DBA therapies in future.
V této práci jsme se zaměřili na roli jadérka v buňce. Zkoumali jsme jeho strukturu, indukci
nukleárního stresu a jeho účinky. Dále jsme se zabývali DBA, což je vrozená anémie mající
původ v aberacích ribozomálních proteinů a jejíž léčba je většinou založena na
kortikosteroidech.
Prvním aspektem této studie bylo popsání vlivu L-OHP a mutace v RPS7 proteinu na strukturu
jadérek. Zjistili jsme, že struktura jadérek je důležitým faktorem ribozomálního stresu a může
být použita pro jeho hodnocení. Dále jsme se zaměřili na roli strukturního proteinu jadérka
BYSL (kódovaným genem Bystin) na fenotyp DBA. Identifikovali jsme bystin jako první možný
gen modifikující onemocnění DBA. Dále jsme zjistili, že bystin řídí patologii DBA
prostřednictvím regulace c-Mycu skrze přímou interakci. Dále jsme prokázali, že bystin je
molekulárním cílem terapie DBA glukokortikoidy. Toto zjištění může vést k vývoji nové terapie
pro DBA pacienty bez závažných vedlejších účinků glukokortikoidů.
Anotace v angličtině
In this work, we focused on the role of the nucleolus in the cell. We explored its structure,
nucleolar stress induction, and its effects. Furthermore, we have explored molecular
pathogenesis of Diamond-Blackfan anemia (DBA), which is congenital anemia originating in
ribosomal proteins aberration, and it is usually treated by glucocorticosteroids.
The first aspect of this study was to estimate the impact of oxaliplatin (L-OHP) and RPS7
mutation on the structure of nucleoli. We revealed that nucleoli structure is an essential factor
in ribosomal stress and can be used for its evaluation. Next, we focused on the role of nucleoli
structure protein BYSL (encoded by Bystin gene) in the DBA phenotype. We employed
biochemical, molecular biology and in silico modelling methods and observed the details of
BYSL behaviour and interaction with the other proteins and investigated bystin targeting by
small molecules. In summary, we have identified bystin as the first disease-modifying gene in
DBA. Mutation of bystin gene improves DBA phenotype and thus it is interesting molecular
target. Furthermore, we determined that bystin improves DBA pathology through c-Myc
regulation via direct interaction. We also proved that bystin is targeted by routinely used
glucocorticosteroid therapy in DBA. This finding may lead to development of novel class of
DBA therapies in future.