Chronická myeloidní leukémie je maligní myeloproliferativní onemocnění s charakteristickým výskytem tzv. Filadelfského chromozomu, který vzniká následkem translokace částí chromozomu 9 na chromozom 22. Takto vzniká fúzní onkogen BCR-ABL, při jehož translaci vzniká tyrozinkináza Bcr-Abl. Cílená terapie pomocí inhibitorů tyrozinkináz (imatinib, nilotinib, dasatinib) způsobila přelom v léčbě této nemoci. Inhibitory tyrozinkináz vykazují velký úspěch při léčbě chronické myeloidní leukémie, avšak ani tento typ léčby se neobejde bez řady vedlejších účinků. U imatinibu je jedním z vedlejších účinků selhání ledvin u části pacientů. Existuje pouze málo studií, které se tímto problémem zabývají. Jako možné příčiny selhání ledvin, které tyto studie navrhují, jsou akutní tubulární nekróza, Fanconiho syndrom nebo blokace receptorů růstového faktoru odvozeného z trombocytů.
V experimentální části této bakalářské práce byly srovnány metabolické profily dvou skupin pacientů s chronickou myeloidní leukémií na léčbě imatinibem. U první skupiny pacientů byla pravděpodobnost selhání ledvin minimální, tato skupina sloužila jako kontrolní, u druhé skupiny bylo naopak riziko selhání ledvin velmi vysoké. Hlavním kritériem u vzorků pro analýzu byly hodnoty glomerulární filtrace. Hodnoty glomerulární filtrace u zdravého pacienta se pohybují okolo 1,5 ml?s-1, čím nižších hodnot glomerulární filtrace dosáhne, tím je riziko selhání ledvin vyšší. Vzorky plazem pacientů byly analyzovány vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem. Získaná data u jednotlivých metabolitů byla mezi sebou porovnána pomocí Studentova t-testu a krabicových grafů. Bylo zjištěno, že většina metabolitů imatinibu u skupiny s nízkými hodnotami glomerulární filtraci je tvořena ve vyšších koncentracích než u skupiny kontrolní.
Anotace v angličtině
Chronic myeloid leukemia is a malignant myeloproliferative disease with characteristic presence of the Philadelphia chromosome, which is created by translocation of part of the chromosome 9 and chromosome 22. This creates the fusion oncogene BCR-ABL. Translation of this gene causes a formation of tyrosinkinase Bcr-Abl. Target therapy with inhibitors of tyrosinkinasis (imatinib, nilotinib, dasatinib) brought about a turn in the treatment of this illness. Inhibitors of tyrosinkinases show a big success in the treatment of chronic myeloid leukemia, however this treatment is not without side effects. One of the imatinib´s side effect is renal failure in the part of the patients. Only few of studies, dealing with those problematic, exist. The possible causes of the renal failure proposed by those studies, are acute tubular necrosis, Fanconi syndrome or the blocation of the platelet-derived growth factor receptors.
In the experimental part of this bachelor thesis we compared metabolic profiles of two groups of patients with chronic myeloid leukemia on the imatinib treatment. The probability of renal failure in the patients from the first group was minimum, this group acted as a control group, on the contrary the second group created an elevated risk of renal failure. The main standard in samples used for analysis was the value of glomerula filtration. The value of glomerular filtration of healthy patients is around 1,5 ml?s-1, the lower the value of glomerular filtration, the higher the risk of the renal failure. The samples of plasmas of the patients were analysated with high performance liquid chromatography tandem with a mass spectrometer. The received datas of the individual metebolites were compared among each other using Student t-test and boxplots. It was discovered, that most of the metabolites of imatinib in the group with low values of glomerular filtration are formed in a higher concentration than those metabolites in a control group.
chronic myeloid leukemia, Philadelphia chromosome, inhibitors of tyrosine kinases, imatinib, drug metabolism, high-performance liquid chromatography, mass spectrometry
Rozsah průvodní práce
58 s.
Jazyk
CZ
Anotace
Chronická myeloidní leukémie je maligní myeloproliferativní onemocnění s charakteristickým výskytem tzv. Filadelfského chromozomu, který vzniká následkem translokace částí chromozomu 9 na chromozom 22. Takto vzniká fúzní onkogen BCR-ABL, při jehož translaci vzniká tyrozinkináza Bcr-Abl. Cílená terapie pomocí inhibitorů tyrozinkináz (imatinib, nilotinib, dasatinib) způsobila přelom v léčbě této nemoci. Inhibitory tyrozinkináz vykazují velký úspěch při léčbě chronické myeloidní leukémie, avšak ani tento typ léčby se neobejde bez řady vedlejších účinků. U imatinibu je jedním z vedlejších účinků selhání ledvin u části pacientů. Existuje pouze málo studií, které se tímto problémem zabývají. Jako možné příčiny selhání ledvin, které tyto studie navrhují, jsou akutní tubulární nekróza, Fanconiho syndrom nebo blokace receptorů růstového faktoru odvozeného z trombocytů.
V experimentální části této bakalářské práce byly srovnány metabolické profily dvou skupin pacientů s chronickou myeloidní leukémií na léčbě imatinibem. U první skupiny pacientů byla pravděpodobnost selhání ledvin minimální, tato skupina sloužila jako kontrolní, u druhé skupiny bylo naopak riziko selhání ledvin velmi vysoké. Hlavním kritériem u vzorků pro analýzu byly hodnoty glomerulární filtrace. Hodnoty glomerulární filtrace u zdravého pacienta se pohybují okolo 1,5 ml?s-1, čím nižších hodnot glomerulární filtrace dosáhne, tím je riziko selhání ledvin vyšší. Vzorky plazem pacientů byly analyzovány vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem. Získaná data u jednotlivých metabolitů byla mezi sebou porovnána pomocí Studentova t-testu a krabicových grafů. Bylo zjištěno, že většina metabolitů imatinibu u skupiny s nízkými hodnotami glomerulární filtraci je tvořena ve vyšších koncentracích než u skupiny kontrolní.
Anotace v angličtině
Chronic myeloid leukemia is a malignant myeloproliferative disease with characteristic presence of the Philadelphia chromosome, which is created by translocation of part of the chromosome 9 and chromosome 22. This creates the fusion oncogene BCR-ABL. Translation of this gene causes a formation of tyrosinkinase Bcr-Abl. Target therapy with inhibitors of tyrosinkinasis (imatinib, nilotinib, dasatinib) brought about a turn in the treatment of this illness. Inhibitors of tyrosinkinases show a big success in the treatment of chronic myeloid leukemia, however this treatment is not without side effects. One of the imatinib´s side effect is renal failure in the part of the patients. Only few of studies, dealing with those problematic, exist. The possible causes of the renal failure proposed by those studies, are acute tubular necrosis, Fanconi syndrome or the blocation of the platelet-derived growth factor receptors.
In the experimental part of this bachelor thesis we compared metabolic profiles of two groups of patients with chronic myeloid leukemia on the imatinib treatment. The probability of renal failure in the patients from the first group was minimum, this group acted as a control group, on the contrary the second group created an elevated risk of renal failure. The main standard in samples used for analysis was the value of glomerula filtration. The value of glomerular filtration of healthy patients is around 1,5 ml?s-1, the lower the value of glomerular filtration, the higher the risk of the renal failure. The samples of plasmas of the patients were analysated with high performance liquid chromatography tandem with a mass spectrometer. The received datas of the individual metebolites were compared among each other using Student t-test and boxplots. It was discovered, that most of the metabolites of imatinib in the group with low values of glomerular filtration are formed in a higher concentration than those metabolites in a control group.
chronic myeloid leukemia, Philadelphia chromosome, inhibitors of tyrosine kinases, imatinib, drug metabolism, high-performance liquid chromatography, mass spectrometry
Zásady pro vypracování
1) Vypracování rešerše na téma: Chronická myeloidní leukemie (CML) a její léčba, metabolismus léčiv, hmotnostní spektrometrie s vysokým rozlišením.
2) Analýza vzorků plasmy pacientů s CML léčených tyrosinkinasovými inhibitory pomocí kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií s vysokým rozlišením.
3) Vyhodnocení metabolického profilu léčiva u jednotlivých pacientů.
4) Organizace klinických dat pacientů.
5) Statistické vyhodnocení a následná interpretace výsledků.
Zásady pro vypracování
1) Vypracování rešerše na téma: Chronická myeloidní leukemie (CML) a její léčba, metabolismus léčiv, hmotnostní spektrometrie s vysokým rozlišením.
2) Analýza vzorků plasmy pacientů s CML léčených tyrosinkinasovými inhibitory pomocí kapalinové chromatografie ve spojení s hmotnostní spektrometrií s vysokým rozlišením.
3) Vyhodnocení metabolického profilu léčiva u jednotlivých pacientů.
4) Organizace klinických dat pacientů.
5) Statistické vyhodnocení a následná interpretace výsledků.
Seznam doporučené literatury
* Sekeres MA, Kalaycio ME, Bolwell BJ. Clinical Malignant Hematology. McGraw-Hill Education, 2007
* Karlíková R, Široká J, Friedecký D, Faber E, Hrdá M, Mičová K, Fikarová I, Gardlo A, Janečková H, Vrobel I, Adam T. Metabolite Profiling of the Plasma and Leukocytes of Chronic Myeloid Leukemia Patients. J Proteome Res. 2016; 15(9):3158-66.
* Jabbour E. Chronic myeloid leukemia: First-line drug of choice. Am J Hematol. 2016; 91(1):59-66.
* Rochat B, Fayet A, Widmer N, Lahrichi SL, Pesse B, Décosterd LA, Biollaz J. Imatinib metabolite profiling in parallel to imatinib quantification in plasma of treated patients using liquid chromatography-mass spectrometry. J Mass Spectrom. 2008; 43(6):736-52.
* Friedecký D, Mičová K, Faber E, Hrdá M, Široká J, Adam T. Detailed study of imatinib metabolization using high-resolution mass spectrometry. J Chromatogr A. 2015; 1409:173-81.
Seznam doporučené literatury
* Sekeres MA, Kalaycio ME, Bolwell BJ. Clinical Malignant Hematology. McGraw-Hill Education, 2007
* Karlíková R, Široká J, Friedecký D, Faber E, Hrdá M, Mičová K, Fikarová I, Gardlo A, Janečková H, Vrobel I, Adam T. Metabolite Profiling of the Plasma and Leukocytes of Chronic Myeloid Leukemia Patients. J Proteome Res. 2016; 15(9):3158-66.
* Jabbour E. Chronic myeloid leukemia: First-line drug of choice. Am J Hematol. 2016; 91(1):59-66.
* Rochat B, Fayet A, Widmer N, Lahrichi SL, Pesse B, Décosterd LA, Biollaz J. Imatinib metabolite profiling in parallel to imatinib quantification in plasma of treated patients using liquid chromatography-mass spectrometry. J Mass Spectrom. 2008; 43(6):736-52.
* Friedecký D, Mičová K, Faber E, Hrdá M, Široká J, Adam T. Detailed study of imatinib metabolization using high-resolution mass spectrometry. J Chromatogr A. 2015; 1409:173-81.
Přílohy volně vložené
1 CD
Přílohy vázané v práci
grafy, tabulky
Převzato z knihovny
Ano
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Obhajobu bakalářské práce studentky Elišky Haasové zahájil prof. RNDr. Zdeněk Dvořák, DrSc. et Ph.D. Studentka seznámila komisi s hlavními částmi a výsledky své práce. Následovalo přečtení posudku vedoucího práce doc. RNDr. Davida Friedeckého, Ph.D. a oponenta Mgr. Ivo Vrobla, Ph.D.
Studentka pak reagovala na připomínky a dotazy.
Prezentace studentky obsahovala tato témata:
- Chronická myeloidní leukémie - výskyt, příčiny, léčba
- Glomerulární filtrace
- Experimentální provedení práce
V rozpravě byly uvedeny následující připomínky či nastoleny tyto problémy:
- Kvantitativní analýza při LC-MS/MS
- Izotopicky značený standard imatinibu a jeho použití
- Hodnoty t-testu vybraných metabolitů
- Počty detekovaných metabolitů v jednotlivých částech práce
- Množství vylučovaných glukuronidů a stav ledvin pacientů
- Stabilita imatinibu v čase
- Budoucí směřování práce
- Biotransformace a jejich produkty
Studentka na dotazy položené oponentem práce a členy komise reagovala pohotově, věcně a přiměřeně.