Tato práce se zabývá vlivem látky grafen oxidu na transkripční aktivitu jaderného receptoru pro vitamín D (VDR). V teoretické části bakalářské práce je nastíněn současný stav dané problematiky. Je zde popsána funkce vitamínu D, jeho izoformy a význam pro lidský organismus. Další kapitola je věnována rodině jaderných receptorů a nalezneme zde podrobnější informace o studovaném jaderném receptoru, čili receptoru pro vitamín D. Následující kapitola se věnuje nanomateriálům, grafenu a samotnému grafen oxidu, jeho struktuře a významu. Experimentální část je rozdělena na dva soubory experimentů. V první části bylo pomocí MTT testu zjišťováno cytotoxické působení částic grafen oxidu na VDR-responzivní buněčnou linii. Výsledky dokázaly, že žádná z použitých koncentrací grafen oxidu nemá na VDR-responzivní buněčnou linii toxické účinky a tudíž mohou být pro další část experimentů použit všechny testované koncentrace. Ve druhé části byla zjišťována schopnost těchto částic aktivovat nebo inhibovat transkripční aktivitu VDR metodou Gene reporter assay. Aktivita VDR byla stanovována pomocí reportérového genu pro luciferázu, který je pod kontrolou VDR responzivních elementů.
Anotace v angličtině
This bachelor thesis deals with influence of graphene oxide nano-platelets on the transcriptional activity of the nuclear receptor for vitamin D (VDR). The theoretical part of this thesis defines the current statement of this problematics. Vitamin D functions are described, also its isoforms and its importance for human organism. The next chapter is dedicated to the family of nuclear receptors and we can find here also more information about the studied nuclear receptor, the vitamin D receptor. The following chapter deals with nanomaterials, graphene and graphene oxide itself, its structure and significance. The experimental part is divided into two sets of experiments. In the first part, the cytotoxic effect of the graphene oxide nano-platelets on the VDR-responsive cell line was detected by the MTT test. The results demonstrated that none of used concentrations of graphene oxide had toxic effect on the VDR-responsive cell line and therefore all tested concentrations could be used for all other experiments. In the second part, it was determined the ability of these particles to activate or inhibit the transcriptional activity of VDR using the Gene reporter assay. VDR activity was determined using a reporter gene for luciferase, which is under the control of VDR responsive elements.
Klíčová slova
grafen oxid, jaderný receptor, VDR, kalcitriol
Klíčová slova v angličtině
graphene oxide, nuclear receptor, VDR, calcitriol
Rozsah průvodní práce
46 s. (96 531 znaků)
Jazyk
CZ
Anotace
Tato práce se zabývá vlivem látky grafen oxidu na transkripční aktivitu jaderného receptoru pro vitamín D (VDR). V teoretické části bakalářské práce je nastíněn současný stav dané problematiky. Je zde popsána funkce vitamínu D, jeho izoformy a význam pro lidský organismus. Další kapitola je věnována rodině jaderných receptorů a nalezneme zde podrobnější informace o studovaném jaderném receptoru, čili receptoru pro vitamín D. Následující kapitola se věnuje nanomateriálům, grafenu a samotnému grafen oxidu, jeho struktuře a významu. Experimentální část je rozdělena na dva soubory experimentů. V první části bylo pomocí MTT testu zjišťováno cytotoxické působení částic grafen oxidu na VDR-responzivní buněčnou linii. Výsledky dokázaly, že žádná z použitých koncentrací grafen oxidu nemá na VDR-responzivní buněčnou linii toxické účinky a tudíž mohou být pro další část experimentů použit všechny testované koncentrace. Ve druhé části byla zjišťována schopnost těchto částic aktivovat nebo inhibovat transkripční aktivitu VDR metodou Gene reporter assay. Aktivita VDR byla stanovována pomocí reportérového genu pro luciferázu, který je pod kontrolou VDR responzivních elementů.
Anotace v angličtině
This bachelor thesis deals with influence of graphene oxide nano-platelets on the transcriptional activity of the nuclear receptor for vitamin D (VDR). The theoretical part of this thesis defines the current statement of this problematics. Vitamin D functions are described, also its isoforms and its importance for human organism. The next chapter is dedicated to the family of nuclear receptors and we can find here also more information about the studied nuclear receptor, the vitamin D receptor. The following chapter deals with nanomaterials, graphene and graphene oxide itself, its structure and significance. The experimental part is divided into two sets of experiments. In the first part, the cytotoxic effect of the graphene oxide nano-platelets on the VDR-responsive cell line was detected by the MTT test. The results demonstrated that none of used concentrations of graphene oxide had toxic effect on the VDR-responsive cell line and therefore all tested concentrations could be used for all other experiments. In the second part, it was determined the ability of these particles to activate or inhibit the transcriptional activity of VDR using the Gene reporter assay. VDR activity was determined using a reporter gene for luciferase, which is under the control of VDR responsive elements.
Klíčová slova
grafen oxid, jaderný receptor, VDR, kalcitriol
Klíčová slova v angličtině
graphene oxide, nuclear receptor, VDR, calcitriol
Zásady pro vypracování
1. Vypracování rešerše na téma bakalářské práce
2. Stanovení cytotoxického působení grafen oxidu na VDR-responzivní buněčnou linii metodou MTT
3. Stanovení transkripční aktivity VDR v přítomnosti grafen oxidu metodou gene reporter assay
4. Vypracování bakalářské práce a multimediální prezentace k obhajobě bakalářské práce
Závěrečná práce bude vypracována v souladu s doporučeným stylem pro závěrečné práce na oboru Biochemie PřF UP uvedeným na webové stránce Katedry biochemie (http://biochemie.upol.cz/index.php/cs/studium/zaverecne-prace).
Práce bude odevzdána na sekretariátě Oddělení buněčné biologie CRH ve dvou svázaných výtiscích obsahujících CD s elektronickou verzí závěrečné práce, a to v řádném termínu uvedeném v harmonogramu na webové stránce Katedry biochemie.
Student je povinen vložit ekvivalentní elektronickou podobu závěrečné práce do systému STAG a doplnit povinné údaje o své práci (viz Opatření děkana Přírodovědecké fakulty UP v Olomouci k provedení některých ustanovení
Studijního a zkušebního řádu UP v Olomouci a Rigorózního řádu UP v Olomouci).
Zásady pro vypracování
1. Vypracování rešerše na téma bakalářské práce
2. Stanovení cytotoxického působení grafen oxidu na VDR-responzivní buněčnou linii metodou MTT
3. Stanovení transkripční aktivity VDR v přítomnosti grafen oxidu metodou gene reporter assay
4. Vypracování bakalářské práce a multimediální prezentace k obhajobě bakalářské práce
Závěrečná práce bude vypracována v souladu s doporučeným stylem pro závěrečné práce na oboru Biochemie PřF UP uvedeným na webové stránce Katedry biochemie (http://biochemie.upol.cz/index.php/cs/studium/zaverecne-prace).
Práce bude odevzdána na sekretariátě Oddělení buněčné biologie CRH ve dvou svázaných výtiscích obsahujících CD s elektronickou verzí závěrečné práce, a to v řádném termínu uvedeném v harmonogramu na webové stránce Katedry biochemie.
Student je povinen vložit ekvivalentní elektronickou podobu závěrečné práce do systému STAG a doplnit povinné údaje o své práci (viz Opatření děkana Přírodovědecké fakulty UP v Olomouci k provedení některých ustanovení
Studijního a zkušebního řádu UP v Olomouci a Rigorózního řádu UP v Olomouci).
Seznam doporučené literatury
1. Lammel T et al.: Potentiating Effect of Graphene Nanomaterials on Aromatic Environmental Pollutant-Induced Cytochrome P450 1A Expression in the Topminnow Fish Hepatoma Cell Line PLHC-1, 2014, Environmental Toxicology
2. Články publikované v odborných periodicích
Seznam doporučené literatury
1. Lammel T et al.: Potentiating Effect of Graphene Nanomaterials on Aromatic Environmental Pollutant-Induced Cytochrome P450 1A Expression in the Topminnow Fish Hepatoma Cell Line PLHC-1, 2014, Environmental Toxicology
2. Články publikované v odborných periodicích
Přílohy volně vložené
1 CD ROM
Přílohy vázané v práci
-
Převzato z knihovny
Ano
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
V úvodu obhajoby předseda komise prof. RNDr. Jozef Šamaj, DrSc. představil studentku přítomným akademickým pracovníkům a hostům. V rámci prezentace své práce studentka seznámila všechny zúčastněné s cíli práce a hlavními metodami využitými při jejím zpracování, dále se získanými výsledky a z nich vyplývajícími závěry.
Následně byl přečten oponentní posudek. Odpovědi na otázky a připomínky uvedené v posudku oponenta a vedoucího diplomové práce studentka zodpověděla uspokojivě, doložila je vypracované v písemné formě v prezentaci a prezentovala také ústně.
V rámci veřejné diskuse zodpověděla následující dotazy položené přítomnými odborníky:
Dr. Takáč: Jaký efekt má grafen oxid na hladinu vitaminu D a na jeho receptor v lidském organismu? Pokud je grafen oxid transportován do cytoplasmy, jaký vliv má na receptor VDR, který je lokalizován v jádře?
Doc. Ovečka: Jakou metodou jste potvrdila, že černě zabarvené buňky obsahují nanočástice grafen oxidu?
Dr. Křenek: Zdá se, že některé buňky mají kulatý tvar a některé oválné, jedná se o různá buněčná stádia?
Prof. Šamaj: Jak byste si pomohla, např, vitálním barvením, abyste dokázala odlišit živé buňky od mrtvých?