Tato bakalářská práce se zabývá oplozením matky včely medonosné (Apis mellifera) a odhadem počtu trubců, kteří se spářili s matkou.
V teoretické části bakalářské práce jsem charakterizovala řád blanokřídlí, čeleď včelovití, rod včela a zařadila jsem včelu medonosnou do taxonomického systému. Popsala jsem život ve včelstvu, základní anatomické a morfologické znaky včely medonosné s důrazem na pohlavní ústrojí matky a trubce. Zaměřila jsem se na páření matky a trubců a věnovala se haplodiploidnímu určení pohlaví u včely medonosné. Dále následuje obecná charakteristika mikrosatelitů a popsání mikrosatelitů izolovaných pro včelu medonosnou.
V praktické části jsem izolovala genomovou DNA 12 matek včely medonosné, od každého jedince dva vzorky. První vzorek byl z hlavy a hrudi, druhý vzorek ze zadečku, kde je uložený semenný váček se spermiemi trubců. Optimalizovala jsem podmínky pro PCR u 15 mikrosatelitů a vybrala jsem z nich 11 polymorfních.
Při testování vzorků poskytly všechny mikrosatelity PCR produkt, ale ani v jenom z případů se nepodařilo získat produkt s DNA ze zadečku odlišný od PCR produktů s DNA izolované z hlavy a hrudi. Celkem jsem u 11 mikrosatelitů detekovala od 2 do 12 alel na lokus.
Anotace v angličtině
This bachelor thesis studies the fertilization of honey bee queens (Apis mellifera) and attemps to estimate the number of drones that mated with the queen bee.
The theoretical section of the thesis contains the characterization of order Hymenoptera, family Apidae and classifies the honey bee in the taxonomical system. Futher more it describes the life in a bee hive, basic anatomy and morphology with emphasis on the reproductive system of the honey bee. It focuses on the mating proces between the queen bee and the drone. Special attention is given to the haplodiploid sex determination of honey bees. A general characteristic of microsatellites and particularly of microsatellites isolated for honey bees ends this section.
In the practical part of the thesis covers the isolations of genome DNA of 12 honey bee queens. From each subject two samples were taken. In the first isolation the head and chest was used, for the second one the abdomen, where the drone's seminal vesicles are located. Conditions were optimized for PCR for 15 microsatellites from which 11 polymorphic ones were chosen.
Every microsatellite produced PCR product while testing, however there were no differences between the DNA gathered from the first and the second isolation. On each of the microsatellites used, 2 to 12 alelles per locus were detected.
honeybee, fertilization, haplodiploid sex determination, microsatellites
Rozsah průvodní práce
48
Jazyk
CZ
Anotace
Tato bakalářská práce se zabývá oplozením matky včely medonosné (Apis mellifera) a odhadem počtu trubců, kteří se spářili s matkou.
V teoretické části bakalářské práce jsem charakterizovala řád blanokřídlí, čeleď včelovití, rod včela a zařadila jsem včelu medonosnou do taxonomického systému. Popsala jsem život ve včelstvu, základní anatomické a morfologické znaky včely medonosné s důrazem na pohlavní ústrojí matky a trubce. Zaměřila jsem se na páření matky a trubců a věnovala se haplodiploidnímu určení pohlaví u včely medonosné. Dále následuje obecná charakteristika mikrosatelitů a popsání mikrosatelitů izolovaných pro včelu medonosnou.
V praktické části jsem izolovala genomovou DNA 12 matek včely medonosné, od každého jedince dva vzorky. První vzorek byl z hlavy a hrudi, druhý vzorek ze zadečku, kde je uložený semenný váček se spermiemi trubců. Optimalizovala jsem podmínky pro PCR u 15 mikrosatelitů a vybrala jsem z nich 11 polymorfních.
Při testování vzorků poskytly všechny mikrosatelity PCR produkt, ale ani v jenom z případů se nepodařilo získat produkt s DNA ze zadečku odlišný od PCR produktů s DNA izolované z hlavy a hrudi. Celkem jsem u 11 mikrosatelitů detekovala od 2 do 12 alel na lokus.
Anotace v angličtině
This bachelor thesis studies the fertilization of honey bee queens (Apis mellifera) and attemps to estimate the number of drones that mated with the queen bee.
The theoretical section of the thesis contains the characterization of order Hymenoptera, family Apidae and classifies the honey bee in the taxonomical system. Futher more it describes the life in a bee hive, basic anatomy and morphology with emphasis on the reproductive system of the honey bee. It focuses on the mating proces between the queen bee and the drone. Special attention is given to the haplodiploid sex determination of honey bees. A general characteristic of microsatellites and particularly of microsatellites isolated for honey bees ends this section.
In the practical part of the thesis covers the isolations of genome DNA of 12 honey bee queens. From each subject two samples were taken. In the first isolation the head and chest was used, for the second one the abdomen, where the drone's seminal vesicles are located. Conditions were optimized for PCR for 15 microsatellites from which 11 polymorphic ones were chosen.
Every microsatellite produced PCR product while testing, however there were no differences between the DNA gathered from the first and the second isolation. On each of the microsatellites used, 2 to 12 alelles per locus were detected.
honeybee, fertilization, haplodiploid sex determination, microsatellites
Zásady pro vypracování
1. Vypracování rešerše na téma bakalářské práce (včela medonosná, oplození u včel, haplodiploidní systém kódování pohlaví u blanokřídlého hmyzu, polymorfní mikrosatelity známé u včely medonosné).
2. Shromáždění dostupných literárních zdrojů.
3. PCR amplifikace DNA včelích matek a zásob trubčího spermatu v jejich tělech pro určení počtu trubců, se kterými se pářily.
Zásady pro vypracování
1. Vypracování rešerše na téma bakalářské práce (včela medonosná, oplození u včel, haplodiploidní systém kódování pohlaví u blanokřídlého hmyzu, polymorfní mikrosatelity známé u včely medonosné).
2. Shromáždění dostupných literárních zdrojů.
3. PCR amplifikace DNA včelích matek a zásob trubčího spermatu v jejich tělech pro určení počtu trubců, se kterými se pářily.
Seznam doporučené literatury
1) Rowe, D.J., Rinderer, T.E., Stelzer, J.A., Oldroyd, B.P., Crozier, R.H. (1997): Seven polymorphic microsatellite loci in honeybees (Apis mellifera). Insectes Sociaux 44, 85-93.
2) Solignac, M., Vautrin, D., Loiseau, A., Mougel, F., Baudry, E., Estoup, A., Garnery, L., Haberl, M., Cornuet, J.M. (2003) Five hundred and fifty microsatellite markers for the study of the honeybee (Apis mellifera L.) genome. Molecular Ecology Notes 3, 307311.
3) Solignac, M., Vautrin, D., Baudry, E., Mougel, F., Loiseau, A., Cornuet, J.M. (2004) A Microsatellite-Based Linkage Map of the Honeybee, Apis mellifera L. Genetics 167, 253-262.
4) Veselý, V. a kol. (2013): Včelařství. 3. vydání, Brázda, Praha.
5) Čermák, K., Gruna, B., Hajdušková, J., Holub, P., Klíma, Z., Kovařík, I., Navrátil, S., Texl, P., Texl, F., Rytina, Tůma, Z. (2015): Včelařství. Pracovní společnost nástavkových včelařů CZ, z.s.
Seznam doporučené literatury
1) Rowe, D.J., Rinderer, T.E., Stelzer, J.A., Oldroyd, B.P., Crozier, R.H. (1997): Seven polymorphic microsatellite loci in honeybees (Apis mellifera). Insectes Sociaux 44, 85-93.
2) Solignac, M., Vautrin, D., Loiseau, A., Mougel, F., Baudry, E., Estoup, A., Garnery, L., Haberl, M., Cornuet, J.M. (2003) Five hundred and fifty microsatellite markers for the study of the honeybee (Apis mellifera L.) genome. Molecular Ecology Notes 3, 307311.
3) Solignac, M., Vautrin, D., Baudry, E., Mougel, F., Loiseau, A., Cornuet, J.M. (2004) A Microsatellite-Based Linkage Map of the Honeybee, Apis mellifera L. Genetics 167, 253-262.
4) Veselý, V. a kol. (2013): Včelařství. 3. vydání, Brázda, Praha.
5) Čermák, K., Gruna, B., Hajdušková, J., Holub, P., Klíma, Z., Kovařík, I., Navrátil, S., Texl, P., Texl, F., Rytina, Tůma, Z. (2015): Včelařství. Pracovní společnost nástavkových včelařů CZ, z.s.
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
ilustrace, schémata, tabulky
Převzato z knihovny
Ano
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
06062018Obhajobu bakalářské práce studentky Kateřiny Sapákové zahájil prof. RNDr. Milan Navrátil, CSc. Studentka seznámila komisi s hlavními částmi a výsledky své práce. Následovalo přečtení posudku vedoucího práce RNDr. Petra Nádvorníka, Ph.D. a oponenta doc. RNDr. Vladana Ondřeje, Ph.D.
Studentka pak reagovala na připomínky a dotazy.
Prezentace studentky obsahovala tato témata:
- Včela medonosná - charakteristika a význam
- Reprodukční strategie včel
- Haplodiploidní systém určení pohlaví
- Mikrosatelity včely medonosné
- Metodika experimentální části práce
- Analýza mikrosatelitů, identifikace polymorfních mikrosatelitů
- Perspektivy výzkumu, návrh strategie dalších experimentů
V rozpravě byly uvedeny následující připomínky či nastoleny tyto problémy:
- Genetická identita trubců a včel, chromozomová výbava trubce
- Kvalita izolované DNA
- Ověření spolehlivosti PCR, mikrosatelitů, použití trubců jako kontroly
- Rozdíly mezi hodnocenými matkami
- csd a fem geny a jejich vztah při určení pohlaví
- šlechtění včel
Studentka na dotazy položené oponentem práce a členy komise reagovala místy váhavě, ale přiměřeně.