Tato práce se zabývá toxickými účinky dimethylsulfoxidu na počet viabilních CD34+ buněk ve štěpu. CD34+ buňky obnovují hematopoezu po transplantaci krvetvorných buněk při léčbě hematologických malignit typu leukemie, lymfomů a nádorů z plazmatických buněk. K měření množství CD34+ buněk ve štěpu je využívána technika průtokové cytometrie.
V teoretické části jsou shrnuty základní poznatky o dané problematice. V praktické části je popsána metodika zpracování štěpu, kryoprezervace a měření jeho kvality. Dále jsou zde uvedeny výsledky experimentu, při kterém se měřil počet viabilních CD34+ buněk před a po aplikaci dimethylsulfoxidu jako kryoprotektiva ke štěpu krvetvorných buněk. Podařilo se prokázat, že po aplikaci dimethylsulfoxidu dochází ke statisticky signifikantnímu snížení počtu viabilních CD34+ buněk.
Anotace v angličtině
This thesis deals with toxic effects of dimethyl sulfoxide on amount of viable CD34+ cells in the graft. CD34+ cells are important for successful engraftment of the graft after transplantation of hematopoietic stem cells during the therapy of hematologic malignancies (such as leukemia, lymphoma or plasma cell tumors). Flow cytometry analysis are used for measurement of the amount of CD34+ cells in the graft.
The theoretical part contains basic information about the given problem. In the practical part there is described the methodology of graft processing, cryopreservation and measurement of its quality. There are also presented the results of the experiment in which was measured the number of viable CD34+ cells before and after application of dimethyl sulfoxide as a cryoprotective agent in the graft. It has been demonstrated that the application of dimethyl sulfoxide statistically significant decreases the viability of CD34+ cells.
Tato práce se zabývá toxickými účinky dimethylsulfoxidu na počet viabilních CD34+ buněk ve štěpu. CD34+ buňky obnovují hematopoezu po transplantaci krvetvorných buněk při léčbě hematologických malignit typu leukemie, lymfomů a nádorů z plazmatických buněk. K měření množství CD34+ buněk ve štěpu je využívána technika průtokové cytometrie.
V teoretické části jsou shrnuty základní poznatky o dané problematice. V praktické části je popsána metodika zpracování štěpu, kryoprezervace a měření jeho kvality. Dále jsou zde uvedeny výsledky experimentu, při kterém se měřil počet viabilních CD34+ buněk před a po aplikaci dimethylsulfoxidu jako kryoprotektiva ke štěpu krvetvorných buněk. Podařilo se prokázat, že po aplikaci dimethylsulfoxidu dochází ke statisticky signifikantnímu snížení počtu viabilních CD34+ buněk.
Anotace v angličtině
This thesis deals with toxic effects of dimethyl sulfoxide on amount of viable CD34+ cells in the graft. CD34+ cells are important for successful engraftment of the graft after transplantation of hematopoietic stem cells during the therapy of hematologic malignancies (such as leukemia, lymphoma or plasma cell tumors). Flow cytometry analysis are used for measurement of the amount of CD34+ cells in the graft.
The theoretical part contains basic information about the given problem. In the practical part there is described the methodology of graft processing, cryopreservation and measurement of its quality. There are also presented the results of the experiment in which was measured the number of viable CD34+ cells before and after application of dimethyl sulfoxide as a cryoprotective agent in the graft. It has been demonstrated that the application of dimethyl sulfoxide statistically significant decreases the viability of CD34+ cells.
V rámci bakalářské práce se bude studentka teoretickým i praktickým způsobem věnovat problematice stanovení viability štěpu krvetvorných buněk metodami průtokové cytometrie.
V teoretické části se zaměří na základy teorie průtokové cytometrie, úvod do biologie nádorové buňky a seznámí se s metodikou přípravy a uchovávání štěpu krvetvorných buněk.
Praktická část bude sestávat z přípravy biologického materiálu k analýze a vlastního stanovení viability štěpu krvetvorných buněk. Cílem práce je poznání mechanizmů ovlivňujících dlouhodobou viabilitu štěpu krvetvorných buněk po konzervaci kryoprotektivy.
Zásady pro vypracování
V rámci bakalářské práce se bude studentka teoretickým i praktickým způsobem věnovat problematice stanovení viability štěpu krvetvorných buněk metodami průtokové cytometrie.
V teoretické části se zaměří na základy teorie průtokové cytometrie, úvod do biologie nádorové buňky a seznámí se s metodikou přípravy a uchovávání štěpu krvetvorných buněk.
Praktická část bude sestávat z přípravy biologického materiálu k analýze a vlastního stanovení viability štěpu krvetvorných buněk. Cílem práce je poznání mechanizmů ovlivňujících dlouhodobou viabilitu štěpu krvetvorných buněk po konzervaci kryoprotektivy.
Seznam doporučené literatury
SHAPIRO HM.: Practical Flow Cytometry, 4th Ed., Hoboken, John Wiley & Sons Inc. 2003, 736 pp, ISBN: 978-0-471-41125-3
ECKSCHLAGER T, a kol.: Průtoková cytometrie v klinické praxi, Praha, Grada Publishing a.s, 1999, 160 pp, ISBN: 80-7169-279-4
Další literatura bude průběžně doplňována při konzultacích
Seznam doporučené literatury
SHAPIRO HM.: Practical Flow Cytometry, 4th Ed., Hoboken, John Wiley & Sons Inc. 2003, 736 pp, ISBN: 978-0-471-41125-3
ECKSCHLAGER T, a kol.: Průtoková cytometrie v klinické praxi, Praha, Grada Publishing a.s, 1999, 160 pp, ISBN: 80-7169-279-4
Další literatura bude průběžně doplňována při konzultacích
Přílohy volně vložené
-
Přílohy vázané v práci
grafy, schémata, tabulky
Převzato z knihovny
Ano
Plný text práce
Přílohy
Posudek(y) oponenta
Hodnocení vedoucího
Záznam průběhu obhajoby
Obhajobu bakalářské práce studentky Elišky Fialové zahájil prof. RNDr. Zdeněk Dvořák, DrSc. et Ph.D. Studentka seznámila komisi s hlavními částmi a výsledky své práce. Následovalo přečtení posudku vedoucího práce RNDr. Martina Nováka, Ph.D. a oponenta Mgr. Jiřího Novotného, Ph.D.
Studentka pak reagovala na připomínky a dotazy.
Prezentace studentky obsahovala tato témata:
- Průtoková cytometrie - princip, imunofenotypizace buněk
- Antigen CD34
- Kryoprezervace buněk
- Experimentální provedení práce
V rozpravě byly uvedeny následující připomínky či nastoleny tyto problémy:
- Způsob interpretace výsledků a dizajn experimentu
- Poměr buněk a kryoprotektantu při kryoprotekci
- Způsob provedení zamrazení buněk
Studentka na dotazy položené oponentem práce a členy komise reagovala pohotově, věcně a přiměřeně.