Thesis info Studium vlivu těžkých kovů na profil sekundárních metabolitů v luštěninách spojením kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií
- All mandatory fields for this Thesis are filled in.
Main topic
Studium vlivu těžkých kovů na profil sekundárních metabolitů v luštěninách spojením kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií
Main topic in English
Study of effect of heavy metals on the profile of secondary metabolites in legumes by combination of liquid chromatography with tandem mass spectrometry
Title according to student
Studium vlivu těžkých kovů na profil sekundárních metabolitů v luštěninách spojením kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií
English title as given by the student
Study of effect of heavy metals on the profile of secondary metabolites in legumes by combination of liquid chromatography with tandem mass spectrometry
Tato práce se zabývá vlivem těžkých kovů a jejich koncentrace na obsah flavonoidů ve dvou odrůdách fazolu. Teoretická část shrnuje poznatky o složení plodů rostlin, metodách extrakce flavonoidů z rostlinného materiálu, jejich separace a detekce. Experimentální část je věnována přípravě extraktů rostlinného materiálu a jejich analýze. Identifikace a kvantifikace jednotlivých flavonoidů byla provedena metodou kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií. Dále byl porovnáván vliv jednotlivých kovů a jejich koncentrací na rostliny a rostliny mezi sebou. Bylo zjištěno, že na zvyšující se koncentraci Ni a Zn reagují obě odrůdy shodně, ale na zvyšující se koncentraci Cr a Cu reagují rozdílně. U odrůdy Carmen dochází k nárůstu flavonoidů, zatímco u odrůdy Blauhilde k poklesu.
Annotation in English
This theses deals with the influence of heavy metals and thein concentration on the kontent of flavonoids in two varieties of bean. The teoretici part summarizes knowlage about plant fruit composition, methods of flavonoid extraction from plant material, thein separation and detection. The experimental part is devoted to preparation of extracts of plant material and their analysis. Identification and quantification of individual flavonoids was performed by tandem mass spectrometry liquid chromatography. Furthermore, the influence of individual metals and their concentrations on plants and plants was compared. It has been found that both varieties react identically to the increasing concentration of Ni and Zn, but they react differently to the increasing concentration of Cr and Cu. In the Carmen variety, flavonoids increase, whereas in the Blauhilde variety, they decline.
Keywords
flavonoidy, těžké kovy, fazol obecný, antioxidanty, UHPLC, MS, QqQ,
Keywords in English
flavonoids, heavy metals, bean, antioxidants, UHPLC, MS, QqQ, QqTOF
Length of the covering note
80 s.
Language
CZ
Annotation
Tato práce se zabývá vlivem těžkých kovů a jejich koncentrace na obsah flavonoidů ve dvou odrůdách fazolu. Teoretická část shrnuje poznatky o složení plodů rostlin, metodách extrakce flavonoidů z rostlinného materiálu, jejich separace a detekce. Experimentální část je věnována přípravě extraktů rostlinného materiálu a jejich analýze. Identifikace a kvantifikace jednotlivých flavonoidů byla provedena metodou kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií. Dále byl porovnáván vliv jednotlivých kovů a jejich koncentrací na rostliny a rostliny mezi sebou. Bylo zjištěno, že na zvyšující se koncentraci Ni a Zn reagují obě odrůdy shodně, ale na zvyšující se koncentraci Cr a Cu reagují rozdílně. U odrůdy Carmen dochází k nárůstu flavonoidů, zatímco u odrůdy Blauhilde k poklesu.
Annotation in English
This theses deals with the influence of heavy metals and thein concentration on the kontent of flavonoids in two varieties of bean. The teoretici part summarizes knowlage about plant fruit composition, methods of flavonoid extraction from plant material, thein separation and detection. The experimental part is devoted to preparation of extracts of plant material and their analysis. Identification and quantification of individual flavonoids was performed by tandem mass spectrometry liquid chromatography. Furthermore, the influence of individual metals and their concentrations on plants and plants was compared. It has been found that both varieties react identically to the increasing concentration of Ni and Zn, but they react differently to the increasing concentration of Cr and Cu. In the Carmen variety, flavonoids increase, whereas in the Blauhilde variety, they decline.
Keywords
flavonoidy, těžké kovy, fazol obecný, antioxidanty, UHPLC, MS, QqQ,
Keywords in English
flavonoids, heavy metals, bean, antioxidants, UHPLC, MS, QqQ, QqTOF
Research Plan
1) Prostudování problematiky v literatuře.
2) Vypracování rešerše pokrývající zadané téma.
3) Optimalizace postupů pro úpravu vzorků
4) Vývoj metody pro LC/MS analýzu vybraných sekundárních metabolitů v luštěninách
5) Hodnocení vlivu přítomnosti těžkých kovů na profil sekundárních metabolitů
Bližší pokyny poskytne vedoucí diplomové práce.
Research Plan
1) Prostudování problematiky v literatuře.
2) Vypracování rešerše pokrývající zadané téma.
3) Optimalizace postupů pro úpravu vzorků
4) Vývoj metody pro LC/MS analýzu vybraných sekundárních metabolitů v luštěninách
5) Hodnocení vlivu přítomnosti těžkých kovů na profil sekundárních metabolitů
Bližší pokyny poskytne vedoucí diplomové práce.
Recommended resources
Odborná literatura bude doporučena vedoucím diplomové práce.
Zahrnuje následující literární zdroje:
1) Elektronická rešerše (Web of Science), Chemical Abstracts příp. Analytical Abstracts,.
2) Sledování původní časopisecké literatury
3) J.E. Girard, Principles of Environmental Chemistry, Jones and Bartlett Publishers, Sudbury, USA 2005.
(ISBN: 0-7637-2471-8)
4) W.M.A. Niessen, Liquid Chromatography ? Mass Spectrometry, Chromatographic Science Series Vol. 79, Marcel Dekker, Inc., New York, USA 1999.
(ISBN: 0-8247-1936-0)
Recommended resources
Odborná literatura bude doporučena vedoucím diplomové práce.
Zahrnuje následující literární zdroje:
1) Elektronická rešerše (Web of Science), Chemical Abstracts příp. Analytical Abstracts,.
2) Sledování původní časopisecké literatury
3) J.E. Girard, Principles of Environmental Chemistry, Jones and Bartlett Publishers, Sudbury, USA 2005.
(ISBN: 0-7637-2471-8)
4) W.M.A. Niessen, Liquid Chromatography ? Mass Spectrometry, Chromatographic Science Series Vol. 79, Marcel Dekker, Inc., New York, USA 1999.
(ISBN: 0-8247-1936-0)
Enclosed appendices
-
Appendices bound in thesis
-
Taken from the library
Yes
Full text of the thesis
Appendices
Reviewer's report
Supervisor's report
Defence procedure record
Bc. Roman FRYČÁK
Student seznámil komisi a přítomné se svojí diplomovou prací na téma Studium vlivu těžkých kovů na profil sekundárních metabolitů v luštěninách spojením kapalinové chromatografie s tandemovou hmotnostní spektrometrií. Na úvod prezentace student přítomné seznámil s cíli práce, s vybranými testovanými rostlinami dvou odrůd fazolu obecného Carmen a Blauhilde a vybranými sledovanými čtyřmi kovy Cr, Cu, Ni, Zn. Student představil podmínky pěstování fazolu, které si vypěstoval sám, dále úpravu vzorků před analýzou, podmínky analýzy UPLC/MS a výsledky obsahu jednotlivých kovů v obou druzích fazolu.
Vedoucí práce stručně shrnul obsah práce, měl několik připomínek k textu v teoretické části s dotazem, co autor myslí výrazem komplexní proudový odraz. K experimentální části měl rovněž několik věcných připomínek. Na závěr ale zhodnotil výsledky práce jako přínosné, ocenil samostatnost, aktivní přípravu experimentů a biologických materiálů. Diplomovou práci doporučil k obhajobě.
Oponentka stručně shrnula obsah práce, kterou považuje za přínosnou a k práci měla několik dotazů např. (přesné znění): Na str. 25 a 26 spomínate, že ste zvyšný extrakt listu využili aj na kyslú a bázickú hydrolýzu s následnou LC-MS analýzou. V diskusii je však len stručná poznámka o kyslej hydrolýze pri identifikácii quercetínu. Mohli by ste stručne komentovať a zhŕnuť prínos tohto postupu vo Vašich analýzach? Na str. 49 máte v MS spektre navrhnutú štruktúru pre hmotu s m/z 147.0495, ktorá vystupuje ako fragment quercetín 3-O-(malonyl)glucosidu (pri KE 5eV). U ďalších MS spektier, napríklad pri quercetín 3-O-xylosylglucoside (Obr.37, KE 5eV), alebo pri quercetínxylosylrutinoside (Obr.41, KE 5eV) táto hmota už nie je prítomná. Vedeli by ste diskutovať túto skutočnosť? Student na všechny dotazy oponentky odpověděl a ta práci doporučila k obhajobě.
Při veřejné diskuzi padly následující dotazy: U hmotnostní koncentrace používáte desetinnou čárku, u výsledků desetinnou tečku, je pro to nějaký důvod? V grafech je užitečné uvádět chybové úsečky, proč je tam nemáte? Je v půdě na Olomoucku zvýšený hygienický limit pro uvedené kovy? U prvotní reakce rostlin byl nárůst antioxidantů pouze u chromu? Student na otázky dobře reagoval.