|
Vyučující
|
-
Oklešťková Jana, Mgr. Ph.D.
|
|
Obsah předmětu
|
Imunitní systém. Imunitní odpověď. Imunoglobuliny - struktura, vlastnosti. Genetika a molekulární biologie protilátek. Reakce antigen-protilátka. Imunochemické metody. Charakteristika polyklonálních a monoklonálních protilátek, charakteristika rekombinantních protilátek. Charakteristika antigenu. Volba a příprava antigenu. Vlastnosti haptenů a metody konjugace. Imunisace a možnosti jejího provedení. Izolace a purifikace protilátek a jejich frakcí. Monoklonální protilátky: hybridomová technologie a její teorie. Charakteristika splenocytů, myelomových buněk a hybridomů, princip jejich selekce. Růstová charakteristika hybridomů. Metody selekce hybridomů produkujících protilátky, immunoassays. Uchovávání a manipulace s hybridomy. Produkce monoklonálních protilátek in vitro ve velkém měřítku; biotechnologie; srovnání s metodami in vivo. Rekombinantní protilátky a teorie jejich přípravy; molekulárně biologické principy. Volba expresního systému. Testování vznikajících protilátek. Přednosti a nevýhody. Vzájemné srovnání protilátek, jejich vlastností, náročnosti na experimentální vybavení a finance.
|
|
Studijní aktivity a metody výuky
|
Přednášení
- Domácí příprava na výuku
- 15 hodin za semestr
|
|
Výstupy z učení
|
Přednáškový kurz má za cíl seznámit posluchače se základními otázkami hybridomové a rekombinantní technologie.
Po absolvování kurzu by student měl být schopen: - Charakterizovat imunitní odpověď. - Popsat základy imuno-chemických metod. - Vysvětlit rozdíly mezi monoklonálními, polyklonálními a rekombinantními protilátkami. - Popsat a interpretovat hybridomové technologie. - Zvážit výhody a nevýhody monoklonálních, polyklonálních a rekombinantních protilátek.
|
|
Předpoklady
|
Student by měl mít základní znalosti z imunologie.
|
|
Hodnoticí metody a kritéria
|
Písemná zkouška
75% úspěšnost při písemném testu
|
|
Doporučená literatura
|
-
auct. (2007). Fundamental Techniques in Cell Culture: A Laboratory Handbook. Sigma-Aldrich.
-
Ferenčík M. (1989). Imunochémia. Alfa, Bratislava.
-
Harlow E., Lane D. (1988). Antibodies a laboratory manual. Cold Spring harbor Lab. USA.
-
McCullough K., Spier R. E. (1990). Monoclonal antibodies in biotechnology: theoretical and practical aspects. Cambridge University Press, Cambridge, UK.
-
Voet D., Voetová J. G. (1990). Biochemie. Victoria Publishing, Praha.
|